公众号

关注Labegou公众号

021-51693631

数据分享 || 通用型Transpro瞬转培养基体系

2020-09-02

Transpro瞬转培养基体系包括Transpro CD01和Transpro feed 1。培养基体系中的Transpro CD01是一种通用型瞬转培养基,可同时用于HEK293细胞和CHO细胞的传代培养、高密度培养和瞬时转染培养,瞬时转染过程中不需要离心换液,在蛋白表达和病毒包装等瞬转过程中,配套瞬转补料Transpro feed 1可以进一步提高瞬转蛋白表达量。Transpro瞬转培养基体系适合采用HEK 293、Expi293、293F、293E等HEK293系列细胞和ExpiCHO、CHOS等CHO系列细胞进行研发过程中抗体、重组蛋白和病毒的瞬时转染表达培养。该体系产品是完全化学成分限定、无动物来源成分、无蛋白成分、无动物或植物来源蛋白水解物、无生长因子,从而避免水解物带来的批次差异性问题。


细胞驯化

多数细胞株使用本产品是不需要任何驯化,直接接种到本培养基,传代三次以上即可。对有些细胞株,使用本系列培养基时可能要采用梯度连续驯化。

连续传代 

按照接种密度0.5×106cells/mL,2天传代,连续传代10次,Expi293活细胞密度可以稳定在2.5×106cells/mL左右,293F活细胞密度可以稳定在2.0×106cells/mL左右,活力均大于98%,细胞形态规则圆整,生长倍增时间正常;

按照接种密度0.3×106cells/mL,2天传代,连续传代10次,ExpiCHO活细胞密度可以稳定在2.8×106cells/mL左右,活力均大于98%,细胞形态规则圆整,生长倍增时间正常。


Batch培养

按照接种密度0.5×106cells/mL,培养7天,过程补加葡萄糖,Expi293最高活细胞密度可至16×106cells/mL左右,293F最高活细胞密度可至9×106cells/mL左右,ExpiCHO最高活细胞密度可至20×106cells/mL左右。

蛋白瞬转 

①转染前一天按照2.0×106cells/mL密度接种,培养第二天细胞密度可至4.0×106cells/mL左右;

②培养第二天细胞计数后,细胞活率>95%,活细胞密度≥4.0×106cells/mL,可直接使用;若细胞密度低于4.0×106cells/mL,可通过离心(800rpm,5 min)收集细胞,将细胞以4.0×106cells/mL密度重悬于Transpro CD01培养基中;

③按照优化后的瞬转工艺,制备DNA和PEI混合液;

④将混合液加入到培养液中,进行培养;

⑤培养18h后,建议补加补料培养基Transpro feed 1 (浓度建议为初始培养体积3-5%),可进一步提高活细胞密度和蛋白表达量。

⑥培养至6天,结束培养。


上方数据表明,Expi293、293F和ExpiCHO在Transpro CD01培养基上均可获得高水平的瞬转效果,从而满足瞬转蛋白和病毒包装的需求。与国外竞争产品对比,均可获得优越的效果,国内客户采用Transpro CD01瞬转培养基,结合优化的培养工艺,CHO瞬转上最高可达1800mg/L的表达量,293瞬转上最高可达1000mg/L的表达量。


产品名称

货号

Transpro   CD01

MS002-1L

Transpro   feed 1

F002-500mL